超微量分光光度计安装办法简单叙述

 

　　超微量分光光度计安装环境的要求有：

 

　　（1）实验室环境要求：主要包括环境温湿度、环境洁净状况、光及磁场干扰等。具体要求如下：

 

　　①环境温湿度  仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5～35℃，相对湿度不超过85%，应控制在45%～65%，无冷凝。如有条件，应配备去湿机（空调）、湿度计等，在相对湿度较大的地区应在仪器周围放一些干燥剂。

 

　　②无强光干扰及磁场干扰  室内照明不宜太强，且避免直射日光的照射。仪器应尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备，防电磁干扰。

 

　　③防止腐蚀性气体  避免在有硫化氢、：二氧化硫以及各种酸雾等腐蚀性气体的场所使用，以免侵蚀仪器的约部件。

 

　　在使用超微量分光光度计时，需要注意一些使用的维护措施：

 

　　1、使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。

 

　　2、取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。

 

　　3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。

 

　　4、测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度zui大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度zui大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。

 

　　5、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。

 

　　超微量分光光度计为了测量不同方向上的光强，上海光度计将灯具安装在分布光度计上，以便于将其定位在规定的角度。分布光度计通常由一个用以支撑和定位灯具或光源以及光度探头的机械装置，连同一些获取和处理数据的辅助设备组成。

 

　　上海光度计基本上可以分为三种：

 

　　一种使灯具绕两根相互垂直的轴旋转，且两根轴的交点是分布光度计光度中心的分布光度计这类分布光度计通常使用一个单独的且安装在离光度中心距离足够远的光度计探头。

 

　　一种分布光度计，灯具仅绕一根轴旋转，灯具与光度探头的相对运动，光度探头在穿过分布光度计的光度中心面内相对于*根轴的角度并跨越*根轴，绕第二根轴作第二种旋转。

 

　　一种灯具*不动的分布光度计。光度探头绕两根穿过分布光度计光度中心且相互垂直的轴旋转。

 

　　超微量分光光度计的使用方法

 

　　1.选择测定波长

 

　　2.接通电源开关，把黑体放在*格并置于光路中，合上样品室暗箱盖，模式处于T 状态下预热20分钟；（断开光路）

 

　　3.将装有参比溶液和被测样品的比色皿依次置于样品室中（参比置于第二个格）。

 

　　4.调0%T：将黑体置于光路中，T 应为0%，否则调“0%T”按键使显示为000。

 

　　5.调Ｔ＝100％：将参比溶液置于光路，T 应为，否则调节“100％Ｔ”按键，使指针指在Ｔ＝100％。（注意：不测定溶液吸光度时，应把黑体置于光路，防止光照长时间照射检测器）。

 

　　6. 样品的测定：把模式设置为A ，将样品液依次处于光路中，分别记下被测样品的吸光度。

 

　　7.测量完毕，及时取出比色皿，用水洗干净后倒置于滤纸上晾干，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净，关掉电源，仪器恢复至初始状态。

 

　　8.填写仪器使用记录表

 

　　大屏幕紫外分光光度计由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其*的、固定的吸收光谱曲线，UV-3802准双光束紫外可见分光光度计可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。

 

　　物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其*的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或 测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

 

　　超微量分光光度计的使用经验

 

　　1、几乎所有的光谱分析仪器都是依据的朗伯-比耳定律。

 

　　2、很多药品要求相对误差在1%以内。

 

　　3、若石英比色皿QC的配对误差为0.1%T，则给使用者带来的分析误差为0.5%。若QC的配对误差为0.5%，则分析误差为3%。

 

　　4、大屏幕紫外分光光度计分析测试时，注进比色皿的溶液不要太满，一般到比色皿高度的2/3即可。

 

　　5、一般的光电检测器如硅光电池、光电管、光电倍增管有疲惫效应，应避免长时间照射、预热时，打开样品室盖，防止光电检测器受光疲惫。

 

　　6、光谱带宽以nm计，狭缝宽度以mm计。

 

　　7、波长正确度在某种程度上，决定光度正确度。

 

　　8、噪声限制紫外可见分光光度计对样品分析浓度的下限，并直接影响仪器的信噪比。杂散光直接限制被分析测试样品浓度的上限。

 

　　9、杂散光对参比光束和样品光束的影响是相同的。

 

　　10、在要求较高的分析测试工作中，紫外可见分光光度计的杂散光应优于0.05%，这样可保证仪器有较宽的线性动态范围。

 

　　11、杂散光通常在紫外区。实际测试时，应检测整个光谱区的两个端点的杂散光。

 

　　12、紫外可见分光光度计的光度噪声与扫描速度有很大关系。一般来讲，扫描速度快的紫外可见分光光度计的噪声也大。

 

　　13、大屏幕紫外分光光度计的基线平直度是指每个波长上的光速噪声。测基线平直度时，扫描速度用慢速。

 

　　14、紫外可见分光光度计的线性动态范围取决于仪器的杂散光与噪声。

 

　　15、为了得到更好的光度正确度，在分析过程中，特别要留意选择试样的zui大吸收峰处的波长作为测试波长。

 

　　16、选择光谱带宽的原则是，在一定的实验条件下，测试吸光度随光谱带宽的变换，以获得zui大吸光度值的光谱带宽作为欲选择的光谱带宽。

 

　　17、判定被测试样是否有光解现象，首先要看测试数据的变化规律，对同一个试样多次丈量，看其吸光度值是否都是向同一个方向变化，假如是，就可能有光解现象。